Оглавление:

Как определить концентрацию ДНК по оптической плотности?
Как определить концентрацию ДНК по оптической плотности?

Видео: Как определить концентрацию ДНК по оптической плотности?

Видео: Как определить концентрацию ДНК по оптической плотности?
Видео: Введение в спектрофотометрию 2024, Ноябрь
Anonim

Концентрация ДНК оценивается путем измерения поглощение на 260 нм, регулируя A260 измерение мутности (измеряется поглощение при 320 нм), умножив на коэффициент разбавления и используя соотношение, что A260 1,0 = 50 мкг / мл чистой дцДНК.

Точно так же люди спрашивают, как определить концентрацию ДНК?

Чтобы определить концентрацию ДНК в исходном образце, выполните следующий расчет:

  1. Концентрация дцДНК = 50 мкг / мл × OD260 × коэффициент разбавления.
  2. Концентрация дцДНК = 50 мкг / мл × 0,65 × 50.
  3. Концентрация дцДНК = 1,63 мг / мл.

Кроме того, что такое хорошая концентрация ДНК? А хороший качественный ДНК образец должен иметь260/ А280 соотношение 1,7-2,0 и A260/ А230 соотношение больше 1,5, но поскольку чувствительность различных методов к этим загрязняющим веществам различается, эти значения следует принимать только в качестве ориентира для определения чистоты вашей пробы.

Таким образом, поглощает ли ДНК на длине волны 280 нм?

Коэффициент оптической плотности при 260 нм против 280 нм - это обычно используется для оценки ДНК загрязнение белковых растворов, так как белки (в частности, ароматические аминокислоты) впитывать свет на 280 нм.

Как вы используете NanoDrop для концентрации ДНК?

В основном нанокапля дает вам возможность выбрать ДНК , РНК, белки. Йо нужно выбрать ДНК , затем налейте 2 мкл воды (предпочтительнее mili Q), выберите «Бланк», затем добавьте еще 2 мкл воды, чтобы убедиться, что мерка равна 0. Затем поместите 2 мкл вашей пробы. Вы получите результат измерения.

Рекомендуемые: