Как определить концентрацию ДНК по оптической плотности?
Как определить концентрацию ДНК по оптической плотности?
Anonim

Концентрация ДНК оценивается путем измерения поглощение на 260 нм, регулируя A260 измерение мутности (измеряется поглощение при 320 нм), умножив на коэффициент разбавления и используя соотношение, что A260 1,0 = 50 мкг / мл чистой дцДНК.

Точно так же люди спрашивают, как определить концентрацию ДНК?

Чтобы определить концентрацию ДНК в исходном образце, выполните следующий расчет:

  1. Концентрация дцДНК = 50 мкг / мл × OD260 × коэффициент разбавления.
  2. Концентрация дцДНК = 50 мкг / мл × 0,65 × 50.
  3. Концентрация дцДНК = 1,63 мг / мл.

Кроме того, что такое хорошая концентрация ДНК? А хороший качественный ДНК образец должен иметь260/ А280 соотношение 1,7-2,0 и A260/ А230 соотношение больше 1,5, но поскольку чувствительность различных методов к этим загрязняющим веществам различается, эти значения следует принимать только в качестве ориентира для определения чистоты вашей пробы.

Таким образом, поглощает ли ДНК на длине волны 280 нм?

Коэффициент оптической плотности при 260 нм против 280 нм - это обычно используется для оценки ДНК загрязнение белковых растворов, так как белки (в частности, ароматические аминокислоты) впитывать свет на 280 нм.

Как вы используете NanoDrop для концентрации ДНК?

В основном нанокапля дает вам возможность выбрать ДНК , РНК, белки. Йо нужно выбрать ДНК , затем налейте 2 мкл воды (предпочтительнее mili Q), выберите «Бланк», затем добавьте еще 2 мкл воды, чтобы убедиться, что мерка равна 0. Затем поместите 2 мкл вашей пробы. Вы получите результат измерения.

Рекомендуемые: