Сколько стоит трансформация перевязки?

2024 Автор: Miles Stephen | [email protected]. Последнее изменение: 2023-12-15 23:40

Трансформация . Добавьте 1-5 мкл перевязка смесь в компетентные клетки для трансформация . Расширенный перевязка с ПЭГ вызывает снижение трансформация эффективность (быстро Перевязка Набор). Электропорация рекомендуется для больших конструкций (> 10 000 п.н.).

Из этого, сколько продукта лигирования мне нужно для трансформации?

Трансформация . Добавьте 1-5 мкл перевязка смесь в компетентные клетки для трансформация . Расширенный перевязка с ПЭГ вызывает снижение трансформация эффективность (быстро Перевязка Набор). Электропорация рекомендуется для больших конструкций (> 10 000 п.н.).

Впоследствии возникает вопрос, что такое лигирование и трансформация? В типичном эксперименте по клонированию исследователи сначала вставляют фрагмент ДНК, например ген, в кольцевой фрагмент ДНК, называемый плазмидой. Этот шаг использует рестрикционные ферменты и ДНК-лигазу и называется перевязка . После перевязка , следующим шагом будет перенос ДНК в бактерии в процессе, называемом трансформация.

Впоследствии также можно спросить, сколько ДНК нужно для лигирования?

Общая концентрация вектор + вставка должна составлять 1-10 мкг / мл для эффективного перевязка . Вектор: рекомендуется ввести молярные отношения от 1: 1 до 1:10 (обычно 1: 3). Если вы не уверены в своем ДНК концентрации, выполнить несколько перевязок с различными соотношениями.

Как долго можно хранить реакцию на перевязку?

Перевязки могут делать при комнатной температуре или прохладнее (предположим, 12-16 ° C) в течение ночи или даже в течение нескольких дней, если ты очень заняты. Вы можете также хранить перевязку в холодильник и вынуть позже, чтобы продолжить лигирование при комнатной температуре в течение длинный как необходимо.